登陸會員
注冊會員
下載中心
病理論壇在線咨詢GS環保組織制備試劑處理組織免疫組化染色對比實驗結果
GS環保組織制備試劑處理組織
免疫組化染色對比實驗結果
病理技術流程中對組織的制備通常使用成本較低的甲醛與二甲苯，病理工作者長期承受甲醛、二甲苯等有毒有害試劑的侵害。哈爾濱格林公司研發的GS環保組織制備試劑（包括固定、脫水、透明）該產品以無醛、無苯等環保性得到認可，近年來在全國許多二級、三級醫院得到應用。在寧波病理中心的免疫組化染色技術流程中，該產品是否能滿足病理診斷的需要，需要在我中心的免疫組化染色操作技術流程條件下對其可靠性進行驗證。
一、實驗方案設計
實驗分兩組，一組為實驗組以哈爾濱格林公司GS系列環保組織制備試劑（包括固定、脫水、透明）進行組織取材后組織制備，一組為對照組以常規10%福爾馬林和二甲苯進行取材后組織制備。取寧波病理中心常規取材后具有代表性的新鮮標本18個，每個標本分別取兩塊，分別采用實驗組和對照組試劑，分別置于ThermoPT420和Leica Prorie脫水機進行固定、脫水、透明浸蠟。使用一致抗體檢驗試劑進行免疫組化染色。切片經由高級職稱的病理醫師分別對比觀察，***終核定其病理診斷的可靠性和應用性。
二、實驗過程
（一）試劑選定
1. 哈爾濱格林公司組織處理試劑
1.1 GSA-01（組織固定液）
1.2 GSA-02（組織脫水液I）
1.3 GSA-03（組織脫水液II）
1.4 GSA-04（組織透明液）
2. 常規組織處理試劑
2.1 10%福爾馬林
2.2 75%酒精
2.3 95%酒精
2.4 無水酒精
2.5 二甲苯
3. 抗體
3.1 ER
3.2 PR
3.3 HER-2
3.4 CK8
3.5 CK19
3.6 CK20
3.7 TTF-1
3.8 CD3
3.9 CD20
3.10 Ki-67
（二）標本選定
寧波市臨床病理診斷中心手術標本（常規取材后），每個標本取1-1.5cm×0.5-1cm×0.3cm大小2塊，分別用于實驗組和對照組。
組織類型包括：
1. 子宮內膜與肌層×3
2. 肺組織×3
3. 扁桃體×3
4. 乳腺導管內原位癌×1
5. 乳腺纖維腺瘤×2
6. 甲狀腺×3
7. 胃癌×1
8. 胃壁組織×2
9. 結腸×3
10. 肝組織×3
（三）實驗方法
1. 實驗組用ThermoPT420脫水機進行脫水機內固定、脫水，透明及浸蠟，具體程序：
GSA-01 2h
75%酒精 30min
75%酒精 30min
80%酒精 1h
GSA-02 40min
GSA-02 1h
GSA-03 40min
GSA-03 1h
GSA-04 1h
GSA-04 1.5h
石蠟 1h
石蠟 1h
石蠟 1h
石蠟 1h
2. 對照組用LeicaPlorie脫水機進行脫水機內固定、脫水、透明及浸蠟，具體程序：
10%福爾馬林 2h
75%酒精 30min
75%酒精 30min
85%酒精 1h
95%酒精 40min
95%酒精 1h
無水酒精 40min
無水酒精 1h
二甲苯 1h
二甲苯 1h
石蠟 1h
石蠟 1h
石蠟 2h
3. 免疫組化染色程序：
對照組及實驗組ER、PR、HER-2、CK20、CD3、CD20、Ki-67的切片均按Roch VENTANA免疫組化儀標準優化程序進行染色并封片。
對照組及實驗組CK8、CK19的切片均按DOKO免疫組化儀標準優化程序進行染色并封片。
4. 切片判讀
由3名具有高級職稱的病理醫師分別對比觀察切片，并記錄。
（四）實驗對比結果
經顯微鏡下對比實驗組與對照組發現：1）兩組均背景干凈，陽性部位準確；2）乳腺組織及子宮內膜ER、PR 、Ki-67檢測中，實驗組細胞核表達呈棕色，對照組陽性細胞核呈棕黑色，但陽性表達的范圍與陽性率一致；3）其余各項指標，兩組間表達范圍及染色程度均一致。
三、實驗對比結論
實驗組與對照組在常用免疫組化染色對比研究中一致性高，無顯著性差異，均達到診斷要求。表明經哈爾濱格林公司組織處理試劑固定脫水透明的標本與常規試劑固定脫水透明的標本在免疫組化染色中能滿足病理診斷的需要。
2014.10.6
下載地址：/uploadfile/file/20170810/20170810135414_43972.docx