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病理論壇在線咨詢GS病理染色套液在常規(guī)制片中的作用
GS病理染色套液在常規(guī)制片中的作用
張海峰 袁燕玲 魯海珍 謝永強(qiáng)
中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院病理科
通過對(duì)細(xì)胞學(xué)免疫組化染色修復(fù)條件的實(shí)驗(yàn)染色結(jié)果對(duì)比，探索細(xì)胞學(xué)免疫組化不同修復(fù)方法的合理選擇。方法 選用中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院L-02正常人肝細(xì)胞株培養(yǎng)的肝細(xì)胞群，應(yīng)用Thinprep2000系統(tǒng)液基薄層細(xì)胞檢測(cè)儀制片，根據(jù)修復(fù)條件的不同分為以下四組：實(shí)驗(yàn)組（透膜后高溫高壓修復(fù)），對(duì)照A組（透膜），對(duì)照B組（高溫高壓修復(fù)），對(duì)照C組（高溫高壓修復(fù)后透膜）。各組均采用第二代ElivisionTM super plus二步法進(jìn)行免疫組化染色，根據(jù)免疫組化的染色結(jié)果進(jìn)行評(píng)分，用spss13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件根據(jù)數(shù)據(jù)性質(zhì)統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組檢測(cè)結(jié)果均為陽性，陽性表達(dá)位于胞漿；實(shí)驗(yàn)組染色效果明顯強(qiáng)于對(duì)照各組（實(shí)驗(yàn)組 7.70±1.69，對(duì)照A組3.35±1.57，對(duì)照B組3.00±1.38，對(duì)照C組6.75±1.83），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 在然后再用高壓鍋熱修復(fù)，再進(jìn)行免疫組化染色，染色效果比較滿意。
1. 材料與方法
1.1 材料
我院32例標(biāo)本40個(gè)蠟快。切片機(jī)（Leica2235）;烤箱；HE染色液；HE全自動(dòng)染封一體機(jī)（LeicaST5020）；中性封片膠；GS染色套液。
1.2 方法
將蠟快分別切兩張切片置烤箱烤20分鐘，然后將其中一套放在全自動(dòng)染封一體機(jī)內(nèi)染色，另一套用GS染色套液手工染色，***后用中性封片膠封片。詳細(xì)步驟如下：全自動(dòng)染封一體機(jī)中：二甲苯去蠟（兩次）各5min，無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇各2min，水洗，蒸餾水洗3min，蘇木素染10min，水洗，蒸餾水洗10s，1%鹽酸酒精分化，水洗，蒸餾水洗，1%氨水返藍(lán)1min， 水洗，蒸餾水洗10s，伊紅5min，70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇各10s，無水乙醇（兩次）各1min，二甲苯（兩次）各1min，封片。GS染色套液中：脫蠟液Ⅰ5min，脫蠟液Ⅱ2min，自來水緩流清洗2min，蘇木素染色液1～3min，自來水緩流清10s，分化液2～3 s，自來水緩流清洗2min，伊紅染色液1～3min，自來水緩流清洗3s，除浮染液3s，瀝干，除水透明液1min，瀝干，透明液2min，潮干封片。
2. 結(jié)果
GS切片染色技術(shù)與常規(guī)染色相比顏色略紅，色彩鮮明，對(duì)比分明，背景干凈，細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，但是細(xì)胞核的顏色稍淺，細(xì)胞邊界欠分明。
3. 討論
常規(guī)染色過程中主要污染源來自二甲苯，GS切片染色技術(shù)不僅杜絕了二甲苯對(duì)人體的傷害，而且常規(guī)染色時(shí)間37分鐘，GS染色時(shí)間12分13秒，染色時(shí)間大大縮短，染色效果符合病理醫(yī)生診斷要求。苯對(duì)于人的傷害已被國際社會(huì)認(rèn)可，很多綠色環(huán)保試劑也在國外大量使用，但國內(nèi)還很少用于臨床。對(duì)于這種從根本上解決污染的染色方法，尚屬于發(fā)展的初級(jí)階段，我們習(xí)慣于常規(guī)的HE染色，新技術(shù)需要的適應(yīng)過程，而徹底替代傳統(tǒng)技術(shù)，就需要我們病理技術(shù)工作者的長期實(shí)踐努力了。
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