格林環保試劑在全自動組織切片染色機中的應用

孫晶  王麗娟  王廣宏  彭俊華  侯紅梅  李雪燕  王浩

棗莊礦業集團中心醫院病理科

摘自：2014年08期《診斷病理學雜志》

全自動組織切片染色機以其機械化的優勢在各級醫院 病理科逐漸被廣泛應用。其良好的工作性能和穩定的染色效果讓其在病理工作中得到接受和肯定。我科在應用全自動染色機以來，使用環保試劑于常規染色切片，其染色效率、染色效果都有顯著改觀，染色質量得到一定提升和較好的保持。

     1.材料與方法

      1.1 儀器和試劑儀器

         日本SAKURA Tissue-Tek DRS全自動組織切片染色機及附帶設備。試劑:①格林環保試劑常規染色套液（包括脫蠟液、蘇木精、返藍液、分化液、伊紅、除浮染液、除水透明液和透明液）；②95%乙醇；③100%乙醇。

      1.2 方法常規石蠟HE染色

將標有病理檢查編號的 4 ~6 pm厚常規切片依次插入染色架，調溫78 ~89尤烘（烤 箱烤片20 min，即可上機染色。一次可染色40張切片，連續 處理時每小時可處理切片約480張，染色液均使用格林環保 試劑。

染色步驟:①脫蠟水洗:環保脫蠟液3步，每步5 min；100%、95%和85%乙醇各3 min自來水洗1 min。②染色分化:環保試劑蘇木精3 min，自來水洗1 min；格林環保試劑分化液或0.3%鹽酸乙醇分化液2 s，自來水洗1 min 15 s；格林 環保試劑返藍液1 min，自來水洗1 min；格林環保試劑伊紅 3 min，水洗10 s。③脫水透明：85%和95%乙醇各10 s； 100%乙醇3 min X 2；環保除水透明液5 min；環保透明液 5 min X2。④封固：取出染色玻片，稍干燥，使用中性樹膠全自動封片機封固。

      2.結果

經過格林環保試劑處理的組織切片染色均勻鮮亮，顏色對比度更好、著色更清晰，鏡下核漿對比效果好。其中子宮內膜（圖1，2)、淋巴組織（圖3)、子宮肌瘤和腸組織（圖4)等組織脫水徹底，結構鮮明，切片質量高。切片染色的******、染色質量的穩定，有助于病理診斷工作質量的穩定和提高。

3.討論

傳統組織切片染色為人工處理，每批次染色條件及時間受不同技術人員操作的影響會有不同的出入，制作周期長、步驟繁瑣、工作量大，尤其在大批量的組織切片處理中，全自 動組織切片染色機就顯現出其穩定、******的優勢。其人性化程序的設定，既保證近批次切片的染色條件較為一致，又保 證根據染液使用的時效來調節時間，利于保持切片染色效果及質量，減少了人為誤差，還可以減少人員投入、減輕工作強 度和改善工作環境，既具有穩定性又具有靈活性，同時具有******性。配合使用環保試劑替代傳統試劑甲醛、二甲苯等有 毒、有害、易揮發、強刺激的試劑，更能減少有毒試劑對病理工作人員身體的危害，同時減少產生大量廢液對環境造成嚴重污染。在染色步驟中，不要苛求快速，適當、合理的處理時間可以延長試劑的使用壽命，減少更換，在保證質量的基礎 上，既降低成本又減少排放。在染色過程中我們總結了幾點經驗:①環保脫蠟液可根據脫蠟的情況適當延長時間，或從 烘（烤）箱中提出切片后立即放入脫蠟液I中，浸泡數秒再上機，可******凝結在玻片上的小蠟點，脫蠟更徹底；②環保試劑 蘇木精在全自動組織切片染色機中使用具有染色時間短、染色時效長、染色質量穩定的優勢，長期使用較少出現蘇木精沉渣和氧化膜，減少染缸的清潔處理次數，降低試劑消耗；③ 在程序中增加了乙醇可更好地保護環保試劑的純度，延長試 劑使用壽命。

使用注意事項:①每天開機后檢查染缸內試劑量，不足的需添加，失效的需更換，尤其注意檢查蘇木精是否出現氧 化膜。脫水梯度試劑和脫蠟液可更換******步，后幾步依次前移，添加***后一步即可。水化的梯度乙醇需同時更換，其他試劑的更換可根據使用經驗和染色效果來適當調節。②水洗槽需每天清理，防止霉變及進水口、出水口堵塞造成對染 色效果的影響。③及時清潔染色缸內、外，防止染液溢濺。④每天擦拭機器表面，注意防塵。

     參考文獻

[1] 孫淑芬，馬福成，李江，等.染色的基本原理/生物染料和蘇木精伊紅染色方法[A].見：王伯沄，李玉松，黃高升，等.病理學技術[M].北京：人民衛生出版社，2000:130 -134.