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病理論壇在線咨詢異丙醇替代二甲苯在快速脫水程序中的應(yīng)用
異丙醇替代二甲苯在快速脫水程序中的應(yīng)用
薛曉偉 李星奇 王德田 鐘定榮
中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院病理科
摘自：2014年02期《診斷病理學(xué)雜志》
病理標(biāo)本送至病理科，經(jīng)過常規(guī)脫水染色程序后，才能進(jìn)行診斷，這個(gè)過程往往需要3 ~5天。隨著小標(biāo)本的數(shù)量增加，該脫水程序已不適合臨床對(duì)病理報(bào)告發(fā)放時(shí)間的要求。本文探討使用異丙醇替代二甲苯作為組織透明劑，應(yīng)用于小標(biāo)本的快速脫水。
1.材料與方法
1.1 材料
選取北京協(xié)和醫(yī)院7月臨床送檢的結(jié)腸等20 余例手術(shù)大標(biāo)本。全自動(dòng)封閉式脫水機(jī)peloris II 2臺(tái)，染色試劑為GS環(huán)保型染色套液，其它試劑為國(guó)產(chǎn)分析純，石蠟 LEICA (58℃ ~60℃）。
1.2 方法
送檢的大組織病理標(biāo)本，經(jīng)病理醫(yī)師模擬結(jié)腸鏡在每份標(biāo)本的相同部位鉗取2份，隨機(jī)分為1h組和常規(guī) 組。1 h脫水程序:4%甲酸1 min， 85%乙醇1 min和6 min (55℃)，乙醇/異丙醇混合液(4:1) 1 min和6 min (55℃ )，異丙醇 1 min X2，異丙醇 12 min (55℃)，石蠟 20 min 和 5 min (85℃)，石蠟1 min (65℃)。常規(guī)脫水程序（略）。程序完成 后，分別進(jìn)行石蠟包埋，3 ~4 μm切片，GS環(huán)保型試劑HE染 色，GC-)2封片膠封固。
2.結(jié)果
2.1 兩組蠟塊質(zhì)量比較
經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，經(jīng)1 h脫水程 序的小組織透明效果較好，硬度適中，蠟塊容易切出3 ~4 μm切片，切片完整無裂痕。與傳統(tǒng)試劑長(zhǎng)時(shí)間脫水程序無明顯差別。
2.2 染色效果比較
經(jīng)1h脫水程序制作的切片，HE染色后切片組織完整，厚薄均勻，核漿分明，符合優(yōu)良片的標(biāo)準(zhǔn) (圖 1，2)。
圖1為1h程序 圖2為常規(guī)程序
3.討論
病理科使用的透明劑二甲苯，因其價(jià)格低廉、透明效果好，常規(guī)應(yīng)用于脫水和染色程序中。但是，二甲苯對(duì)************系統(tǒng)具有慢性毒性作用。近年來，多種二甲苯的替代劑相繼出現(xiàn)，本實(shí)驗(yàn)中采用異丙醇作為快速脫水程序中的透明劑使用，采用GS環(huán)保型染色套液進(jìn)行染色，取得了較好的效果。由于異丙醇處理組織過程中的重要作用是軟化組織，且對(duì)組織收縮作用較大，為避免組織由無水乙醇入 異丙醇造成的組織驟縮，本次實(shí)驗(yàn)特別設(shè)計(jì)了省去無水乙醇，采用兩步乙醇/異丙醇4: 1混合液的方法。結(jié)果證明，組織沒有出現(xiàn)明顯的驟縮。同時(shí)，在HE染色過程中使用GS 環(huán)保型試劑，取得良好的制片效果，說明GS環(huán)保型試劑可以應(yīng)用于快速脫水處理的切片染色中。
總之，異丙醇作為透明劑應(yīng)用于快速脫水程序中是可行的，GS環(huán)保型試劑適用于快速脫水的組織切片染色，染色質(zhì)量?jī)?yōu)良。快速脫水程序不僅能夠病理標(biāo)本的個(gè)性化處理，減少患者病理報(bào)告等待時(shí)間，更重要的是對(duì)病理從業(yè)人員的二
甲苯接觸危害大大降低了。但是，經(jīng)過異丙醇透明的快速脫水后的標(biāo)本，特殊染色和免疫組化的質(zhì)量如何，是我們下一步實(shí)驗(yàn)所要探討的重點(diǎn)。
參考文獻(xiàn)
[1] 王德田，董建強(qiáng)，梁志勇.實(shí)用現(xiàn)代病理學(xué)技術(shù)[M].北京： 北京協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社，2012:61 -62.
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