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病理論壇在線咨詢GS組織染色套液在全自動組織切片染色機中的應用
GS組織染色套液在全自動組織切片染色機中的應用
張文 劉爽 劉亮 劉琳
白求恩國際和平醫院病理科
摘自：2014年01期《診斷病理學雜志》
在傳統HE染色過程中，組織切片脫蠟、透明常使用二甲苯，雖然制片技術穩定，但是二甲苯易揮發、具有高度的刺激性，可使人體神經系統、造血系統造成不同程度的損傷，蘇木素染液中含有汞成份，這些不僅對技術員的自身毒害很大，而且嚴重污染工作環境和生活環境。哈爾濱格林標本技術開發有限公司研制的環保型GS組織染色套裝試劑，具有 環保、******、無色、無異味、無刺激性，染液PH值適中及不含汞成分等優點，我們將其應用到我院病理常規工作中，收到了較好的制片效果。
1. 材料與方法
1.1 標本
隨機取自白求恩國際和平醫院手術標本，包括乳腺、胃、食管、甲狀腺、淋巴結、肺、腎、腦、子宮、卵巢等。
1.2 試劑
GS組織染色套液包含組織脫蠟液、蘇木精染液、分化液、藍化液、伊紅染液、組織除水透明液、組織透明液等，環保封片膠，由哈爾濱格林標本技術開發有限公司研制并生產。
1.3 方法
選取不同手術標本組織塊進行切片，各2套，厚4 pm。①傳統HE染色經二甲苯I、I各3 min ；二甲苯III 4 min；無水乙醇I、II脫苯1 min；95%乙醇1 min x2次；85% 和75%乙醇各30 s；流水洗2 min；蘇木精2 ~ 8 min；流水洗 1 min；0.5%鹽酸乙醇分化3 s ，流水洗；水洗返藍2 min； 1% 水溶伊紅染30 s ~2 min；流水洗；85%乙醇30 s；95%乙醇 10 s；無水乙醇I 1 min；無水乙醇II 2 min ；二甲苯I 1 min；二甲苯II、II透明各2 min，中性樹膠封片。共耗時40 min。 L4環保型GS染色套液染色脫蠟液I4min、^各4min； 95%乙醇30 s，流水洗；蘇木精染3 min，流水洗15 s；分化液 3 s，流水洗1. 5 min；藍化液7 s，流水洗30 s ；伊紅染40 s；流水洗10 s；除浮液3 s ；除水透明液1 min ；透明液2 min ；環保封片膠封片。共耗時18 min左右。
2. 結果
同一例標本切片分別進行GS染色套液染色和傳統HE染色試劑染色，染色后比較，經GS染色套液染色良好，細胞核染色清晰，伊紅顏色鮮艷，著色均勻一致，核漿對比分明， 色彩鮮艷、結構顯示清晰，沒有過染和著色不良現象（圖1，2)。染色時間大大縮短，提高了工作效率。
國內目前見有TO、VAN -CLEAR、WAX-OUT、益利、長島、宏茲、江源等多種二甲苯替代產品試用報道，其性能各有優劣，但缺乏大標本量的使用報告。
我們采用同一例組織分別切片，同批進行環保GS染色套液于Leica全自動染色機染色和傳統HE染色試劑染色，染色對比分析，結果相當滿意。應用環保GS染色套液染色的切片，核漿對比分明，色彩鮮艷、結構顯示清晰，明顯優于傳統方法制片的HE染色。切片在染色過程中脫蠟、透明效果好，時間短，大大縮短了染色時間。染色套液中蘇木精液中無汞，對人體無害，染色效果好，效率高。同時GS封片膠中無苯，做到了******、無害。
環保GS染色套液經大批量應用于Leica全自動染色機后，我們體會到，為保證染色結果穩定，需染色累計計數后更新染色套液。即計數染色2000張切片后，更新整套環保GS 染色套液，更新后要試染色一次。其間每500張切片更新脫 蠟液、無水乙醇以及透明液。由于HE染色中的蘇木素核染 色為退行性染色，故蘇木素染色時間以及分化、藍化時間至 關重要，應隨著染色片數的增加微調染色、分化藍化時間，且調整后要試染色一次。
綜上所述，環保型GS染色套液完全可以替代傳統方法，滿足病理診斷技術要求，減少或替代二甲苯毒害試劑的應用，降低室內有毒有害氣體的污染和毒害，從而杜絕排放此類毒化物對生活環境的污染，真正意義上實現了健康、環 保、優質、******。環保型GS染色套液值得在常規病理染色過程中推廣應用。
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