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病理論壇在線咨詢環(huán)保型染色套液在常規(guī)病理組織切片染色中的應用
環(huán)保型染色套液在常規(guī)病理組織切片染色中的應用
田玉旺 朱紅艷 朱培雙 邢宜
北京軍區(qū)總醫(yī)院病理科
摘自：2013年10期《診斷病理學雜志》
在常規(guī)病理組織切片染色過程中，二甲苯、含汞蘇木精染液等作為病理常規(guī)試劑被大量應用，這些試劑具有強烈的 刺激性和揮發(fā)性，不僅污染環(huán)境而且嚴重危害身體健康。尋找一種對人體******、無害且安全的替代品，已成為病理技術(shù)工作者的一種迫切愿望。我們將環(huán)保型染色套液應用于常規(guī)病理組織切片染色過程中，收到了較好的效果。
1. 材料與方法
1.1 標本
選取北京軍區(qū)總醫(yī)院病理科2011-01—2012-01 間臨床送檢的各種活體組織標本200例，其中包括正常乳腺及乳腺癌、甲狀腺、胃黏膜、結(jié)腸癌、肺癌、卵巢癌、淋巴結(jié)、 腎、脂肪、子宮肌瘤、食管及皮膚等組織。
1.2 試劑
環(huán)保型染色套液包括：脫蠟液、無汞蘇木精染液、分化液、返藍液、伊紅染色液、除浮染液、除水透明液和透明液（哈爾濱格林標本技術(shù)開發(fā)有限公司研制生產(chǎn)）；傳統(tǒng)染色試劑包括：二甲苯、梯度乙醇、含汞蘇木精、1%鹽酸乙 醇、氨水和伊紅。
1.3 方法
組織經(jīng)常規(guī)4%中性甲醛固定，乙醇脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，切片厚4 ~5 μm。 每種組織切片2張，一張采用傳統(tǒng)HE染色；另一張采用環(huán)保型染色套液進行HE 染色，比較二者染色效果。傳統(tǒng)HE染色步驟:①切片經(jīng)二甲苯I、Ⅱ脫蠟各5min；②無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇各 2 min，自來水洗；③蘇木精染8 min，自來水洗；④1%鹽酸乙醇分化數(shù)秒鐘，自來水洗；⑤1%氨水返藍1 min，自來水洗； ⑥1%水溶性伊紅染1 min；70%乙醇、95%乙醇各10 s，無 水乙醇I、II各2 min，二甲苯I、II各2 min，中性樹膠封固。環(huán)保型染色套液HE染色步驟:①切片經(jīng)脫蠟液I 5 min，脫 蠟液I 5 min，自來水洗2 min；②無汞蘇木精染色液3 ~ 5 min，自來水洗10 s；③分化液2 ~3 s，自來水洗1 min；④藍化液1 min，自來水洗1 min；⑤伊紅染色液1 ~3 min，自來水洗3 s；⑥除浮染液3 s，瀝干殘余試劑；⑦除水透明液1 min，瀝干；⑧透明液3 min，無苯封片膠封固。
2. 結(jié)果
采用環(huán)保型染色套液進行HE染色，染液滲透力強，染色速度快，組織結(jié)構(gòu)顯示清晰，色彩鮮艷，核漿對比分明；與傳統(tǒng)HE染色結(jié)果相比二者無明顯差異（圖1，2)。
圖1乳腺組織，環(huán)保型染色套液HE染色
3. 討論
在傳統(tǒng)HE染色過程中，二甲苯作為***常用的苯類試劑被病理實驗室大量使用，它極易揮發(fā)，是一種對人體具有較強毒害作用的有機化學試劑。其主要毒性是對************和植物神經(jīng)的麻醉及黏膜的刺激作用，主要通過呼吸道或經(jīng)皮膚吸收，長期接觸有致癌作用。它除對操作者的健康構(gòu)成威脅外，如果將廢棄的試劑不經(jīng)專業(yè)處理直接傾倒入下水道，會造成周邊環(huán)境及城市水系的嚴重污染，而采用專業(yè)回收處
理會大大提高成本。
為了克服二甲苯存在的缺點，我科使用環(huán)保型病理切片染色套液進行常規(guī)活檢切片HE染色，收到了理想的制片效 果。這些試劑均為非苯類******型復合試劑，可以替代二甲苯對組織切片進行脫蠟和染色脫水后的透明處理以及封固，徹底根除了二甲苯對人體的傷害及其對環(huán)境的污染。脫蠟劑使組織切片脫蠟徹底、速度快、不出現(xiàn)脫蠟不足的現(xiàn)象；透明
劑對組織滲透力強、作用溫和、切片透明度好，保證了切片的染色質(zhì)量。環(huán)保型染色套液中的蘇木精為無汞染液，對人體 ******無害，對組織親和力強，染色速度快，不易產(chǎn)生氣化膜而污染組織，切片長期存放細胞核不易褪色，染液使用時間長
并且不需自行配制，便于實驗室對切片進行質(zhì)量控制。鏡下組織切片色彩鮮艷，細胞結(jié)構(gòu)清晰，核漿對比分明，與傳統(tǒng) HE染色效果基本一致。
總之，新型環(huán)保型病理切片染色套液具有創(chuàng)新性和實用 性，染色效果穩(wěn)定可靠，完全可以替代傳統(tǒng)的有毒病理試劑，并且有利身體的健康，減少了環(huán)境污染，值得在病理實驗室廣泛推廣使用。
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