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病理論壇在線咨詢GS環(huán)保試劑套液在骨髓穿刺石蠟切片中的應用
繆勇建 王華
廣西醫(yī)科大學******附院病理科
摘自：2011年第05期《診斷病理學雜志》
我科過去做骨髓穿刺石蠟切片都應用常規(guī)的甲醛固定及酒精脫水二甲苯透明，為了讓骨髓穿刺組織更易于切片、常規(guī)染色和特染更鮮艷、免疫組化陽性更好，筆者不斷改進脫水程序，但骨組織還是太硬，造血細胞收縮較明顯，不能切出完美的薄切片（1～1.5μm），無法看清胞漿胞核內(nèi)顆粒，因為骨髓組織經(jīng)脫鈣后再入常規(guī)脫水劑中會嚴重收縮，原長度為1cm的骨穿組織會變成只有0.8cm；從2009年10月開始用GS 環(huán)保試劑至今，不但骨髓穿刺組織好切片，大塊脫鈣骨組織也很好切，且細胞無明顯收縮，染色正常。
1. 材料與方法
1.1材料
我院一年來所有的骨髓穿刺標本約400例，GS環(huán)保試劑套液(由哈爾濱格林標本技術(shù)開發(fā)有限公司研制并生產(chǎn))，脫水機為Shandon Pathcentre全封閉全自動脫水機，Shandon Finesse旋轉(zhuǎn)石蠟切片機，櫻花全自動染色機，自配HE染色液，櫻花自動封片機、中性樹膠等。
1.2方法
骨髓穿刺標本經(jīng)脫鈣后入下列程序處理（大小不同的標本均放在一起）：
|
試劑溶液 |
時間設定 |
溫度 （℃）設定 |
P/V循環(huán)（壓力和真空交替） |
混合循環(huán) |
|
1、GSA01（Ⅰ） |
2.00h |
40 |
＋ |
＋ |
|
2、GSA01（Ⅱ） |
1.00h |
40 |
＋ |
＋ |
|
3、70％乙醇 |
40min |
40 |
＋ |
＋ |
|
4、80％乙醇 |
40min |
40 |
＋ |
＋ |
|
5、GSA02（Ⅰ） |
1.00h |
40 |
＋ |
＋ |
|
6、GSA02（Ⅱ） |
40min |
40 |
＋ |
＋ |
|
7、GSA03（Ⅰ） |
1.00h |
40 |
＋ |
＋ |
|
8、GSA03（Ⅱ） |
40min |
40 |
＋ |
＋ |
|
9、GSA04（Ⅰ） |
1.00h |
40 |
＋ |
＋ |
|
10、GSA04（Ⅱ） |
40min |
40 |
＋ |
＋ |
|
11、GSA05（Ⅰ） |
40min |
65 |
＋ |
＋ |
|
12、GSA05（Ⅱ） |
50min |
65 |
＋ |
＋ |
|
13、GSA06（Ⅰ） |
1.00h |
65 |
＋ |
＋ |
|
14、GSA06（Ⅱ） |
1.00h |
65 |
＋ |
＋ |
從脫水機取出，石蠟包埋，切片厚度1～1.5μm ，在自動染色機中用環(huán)保脫蠟至水洗，常規(guī)HE染色（蘇木精染液不含汞），脫水、透明、中性樹膠封片。
2. 結(jié)果
細胞紅藍鮮艷，對比正常，胞體豐滿，組織結(jié)構(gòu)清晰圖（1，2，3）。
3. 討論
由于組織細胞常規(guī)染色形態(tài)正常，色彩也鮮艷，做特染、免疫組織化學和ISH都有“出色表現(xiàn)”，己經(jīng)被我科所有診斷醫(yī)師認可；由于脫水機使用了GS環(huán)保試劑，我們在更換試劑或舊石蠟時再也沒有二甲苯那令人窒息的臭味，也沒有甲醛的刺眼，維護機器時從容不迫了，環(huán)境大大改善。筆者認為GS環(huán)保試劑可以信賴，關鍵在于如何根據(jù)自己的使用環(huán)境和設備狀態(tài)，巧妙設計程序。根據(jù)每一缸的新舊情況變化，適時調(diào)整和及時更換也至關重要。每套程序都是有“個性”的，不能完全照搬！程序看似簡單，但只有深刻理解了才會設計出高水平的程序。
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