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病理論壇在線咨詢GS－新型環保病理組織標本處理試劑應用報告
GS－新型環保病理組織標本處理試劑應用報告
連國亮 石鳳茹 肖磊
首都醫科大學附屬北京安貞醫院病理科
常規石蠟包埋切片，蘇木素－伊紅染色(HE)是當前醫院病理科進行病理診斷的常規方法，是保證病理診斷準確***重要的環節。只有做出優質石蠟切片，才能準確做出組織化學、免疫組織化學染色，有助于提高病理診斷和鑒別診斷的準確率。但傳統石蠟切片制作過程中大量使用甲醛、二甲苯等有毒有害試劑，對操作人員產生巨大傷害，成為了病理工作中無形的殺手，同時產生的廢棄物，又會對環境造成更嚴重的二次污染，甲醛、二甲苯更成為了人們對病理科望而卻步的魔鬼。并且傳統組織處理過程紛繁復雜，尤其二甲苯對組織處理時間準確度要求較高，試劑量消耗較大，耗費了更多的人力、物力和財力。而新型格林組織固定脫水系列套裝試劑和HE染色系列套裝試劑為無苯無害試劑，2009年8月始我們對格林公司的上述試劑進行了試用，現將試用結果介紹如下。
一、試用計劃
1．材料
選取我院病理科09年8月至11月各種病理組織標本200例，包括脂肪，子宮，胎盤，皮膚，小腸等組織。
2．儀器設備
選用櫻花全自動密閉脫水機，櫻花組織自動包埋機，徠卡封片機。
3．操作方法
使用格林公司無苯試劑，按照其推薦的方法進行組織處理（包括固定、脫水、透明、浸蠟、包埋，HE染色以及樹膠封固全套試劑）
二、結果對比
（一）組織處理程序對比
|
序號 |
傳統組織處理程序 |
格林系列套裝試劑處理程序 |
備注 |
||
|
溶液種類 |
時間 |
溶液種類 |
時間 |
||
|
1 |
10%中性甲醛液 |
60分鐘 |
固定液 |
210分鐘 |
|
|
2 |
80%酒精溶液脫水 |
60分鐘 |
脫水液 |
90分鐘 |
|
|
3 |
95%酒精溶液I脫水 |
60分鐘 |
脫水液 |
90分鐘 |
|
|
4 |
95%酒精溶液I脫水 |
60分鐘 |
透明液 |
90分鐘 |
|
|
5 |
95%酒精溶液II脫水 |
60分鐘 |
|
0分鐘 |
|
|
6 |
純酒精溶液I脫水 |
60分鐘 |
|
0分鐘 |
|
|
7 |
純酒精溶液II脫水 |
60分鐘 |
|
0分鐘 |
|
|
8 |
純酒精溶液III脫水 |
60分鐘 |
|
0分鐘 |
|
|
9 |
二甲苯溶液I透明 |
60分鐘 |
|
0分鐘 |
|
|
10 |
二甲苯溶液II透明 |
30分鐘 |
|
0分鐘 |
|
|
I |
48~50℃石蠟浸蠟 |
60分鐘 |
浸蠟液 |
150分鐘 |
|
|
II |
50~56℃石蠟浸蠟 |
60分鐘 |
浸蠟液 |
150分鐘 |
|
|
III |
58~60℃石蠟浸蠟 |
60分鐘 |
|
0分鐘 |
|
|
IV |
58~60℃石蠟浸蠟 |
60分鐘 |
|
0分鐘 |
|
|
|
|
810分鐘 |
|
780分鐘 |
|
（二）染色程序對比
|
序號 |
傳統染色程序 |
格林系列套裝試劑組織染色程序 |
備注 |
||
|
|
程序 |
時間 |
程序 |
時間 |
|
|
1 |
脫蠟:1-4缸 |
10*4分鐘 |
1．脫蠟 |
15分鐘 |
|
|
2 |
無水酒精 |
3分鐘 |
2．脫蠟 |
5分鐘 |
|
|
3 |
95%酒精 |
3分鐘 |
3．水洗 |
|
|
|
4 |
80%酒精 |
3分鐘 |
4．蘇木素 |
1-3分鐘 |
|
|
5 |
蘇木素 |
5-10分鐘 |
5．水洗 |
數秒 |
|
|
6 |
自來水水洗 |
1分鐘 |
6．分化液 |
3秒 |
|
|
7 |
自來水返藍 |
5分鐘 |
7．水洗反藍 |
|
|
|
8 |
伊紅 |
1分鐘 |
8．伊紅 |
1分鐘 |
|
|
9 |
80%酒精脫水 |
2分鐘 |
9．水洗 |
數秒 |
|
|
10 |
95%酒精 |
5分鐘 |
10．除浮液 |
3秒 |
|
|
11 |
無水酒精 |
5分鐘 |
11．瀝干 |
|
|
|
12 |
無水酒精 |
5分鐘 |
12．脫水透明液 |
2分鐘 |
|
|
13 |
丙酮 |
5分鐘 |
13．瀝干 |
|
|
|
14 |
丙酮 |
5分鐘 |
14．透明液 |
1分鐘 |
|
|
15 |
二甲苯 |
10分鐘 |
15．潮干 |
|
|
|
16 |
二甲苯 |
10分鐘 |
16．無苯膠水封片 |
|
|
|
17 |
二甲苯 |
10分鐘 |
|
|
|
1）HE染色系列套裝試劑化學成分與組織脫水套裝試劑基本相同。
2）蘇木素，伊紅，染色所用時間短，著色能力強，核質清晰。
3）脫蠟劑在室溫下2×5分鐘對組織脫蠟，******缸脫蠟，第二缸脫蠟基本無味。
4）蘇木素常規染色大于1分鐘，對低濃度分化液非常敏感，分化時間嚴格制。
5）水洗返藍1鐘即可，同時反復擺動，提倡節約水資源。
6）伊紅常規染色大于1分鐘，但數秒也可著色。